染料法熒光定量PCR試劑盒通過對PCR擴增反應(yīng)中的每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時監(jiān)測從而實現(xiàn)對起始模板的定性及定量分析。目前它主要通過兩種方式一熒光染料或者熒光標(biāo)記的探針對PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤,實時在線監(jiān)控反應(yīng)過程,并結(jié)合相應(yīng)的軟件對產(chǎn)物進(jìn)行分析,計算待測樣品模板的初始濃度。 染料法熒光定量PCR試劑盒采用的實時熒光定量技術(shù)是生命科學(xué)領(lǐng)域的一項重要技術(shù),是快速檢測基因表達(dá)水平的快捷方法,是一種在DNA擴增反應(yīng)中,以熒光化學(xué)物質(zhì)測每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法,通過內(nèi)參或者外參法對待樣品中的特定DNA序列進(jìn)行定量的分析。高靈敏度、高重復(fù)性、高分辨率、動力學(xué)范圍廣,儀器穩(wěn)定性有保障,數(shù)據(jù)能夠比較真實的反映出樣品中RNA的相對含量變化。
染料法熒光定量PCR試劑盒產(chǎn)品特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 根據(jù)TB 基因的保守序列設(shè)計引物,引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性高。
3. 采用了改良后的Taq Polymerase,具有高擴增效率,高擴增靈敏度,高擴增特異性的特點。
4. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
熒光染料法:在PCR反應(yīng)體系中,加入過量熒光染料,該染料只與雙鏈DNA小溝結(jié)合,并不與單鏈DNA鏈結(jié)合,而且在游離狀態(tài)不發(fā)出熒光,只有摻入DNA雙鏈中才可以發(fā)光,因此,在PCR體系中,隨著特異性PCR產(chǎn)物的指數(shù)擴增,每個循環(huán)的延伸階段,染料摻入雙鏈DNA中,其熒光信號強度與PCR產(chǎn)物的數(shù)量呈正相關(guān)。